多重聚合酶链反应检测生殖支原体感染

摘要

目的建立一种敏感快速的多重聚合酶链反应(PCR)用于检测生殖支原体(Mg).方法性病门诊患者511例,正常对照56人.分泌物(女性为宫颈、男性为尿道拭子)标本用NP-40裂解液一步法制备模板DNA.设计Mg种属特异性引物及功能性结蛋白基因引物,先进行标准株的特异性与敏感性试验,然后进行临床标本的PCR扩增反应.结果两对引物有良好的特异性,对Mg标准株模板敏感性可达10-6μg.临床标本检测,广东地区261例性病门诊患者的Mg-DNA阳性率(54/261,20.7%)高于上海(9/84,10.7%)、常州(8/70,11.4%)及南京地区(11/96,11.5%;χ2=16.1,P?.01),后三者的感染率互相间比较,差异无显著性(χ2=0.056,P>0.05).性病门诊患者511例的Mg-DNA总阳性率(82/511,16.1%)与56例正常对照者(1/56,1.8%)比较,差异有非常显著性(χ2=7.882,P?.01).结论建立的PCR技术检测Mg具有敏感、快速、特异的特点,是一种可靠的实验诊断手段.