多重逆转录聚合酶链反应同步检测A组轮状病毒G基因型的研究

摘要

目的为了检测A组轮状病毒VP7的基因型,建立一步多重逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)同步检测A组轮状病毒G基因型技术.方法在参照文献并分析A组轮状病毒VP7基因的基础上,选取了一个共用的下游引物RVG9和6个A组轮状病毒G基因型G1、G2、G3、G4、G8和G9的特异性上游引物,利用多重RT-PCR技术对标准株和样品进行检测.结果进行一轮RT-PCR,即可至少同时检出5种不同标准株混合物中的各个基因型.对纯化的A组轮状病毒标准株RNA O265进行系列稀释后,其检测灵敏度可达1PFU.经对A组轮状病毒阳性的60份样本进行检测,其中G3有51例、G2有4例,G1与G3混合感染3例,另外尚有2例不能分型. 结论本研究建立的一步多重RT-PCR技术对A组轮状病毒基因型研究将为临床诊断和实验研究提供一种快速、灵敏和特异的检测手段.