幽门螺杆菌及其培养上清液粗提蛋白对兔离体胃壁细胞酸分泌的影响

摘要

目的通过研究幽门螺杆菌（Hp）及其培养上清液粗提蛋白（BCF-P）对兔离体胃壁细胞酸分泌的影响,探讨 Hp 感染引起宿主胃酸分泌状态改变的可能机制。方法兔胃体黏膜经Ⅰ型胶原酶消化、离心淘洗后获得新鲜分离的壁细胞,并进行短期培养。提取 Hp 培养上清液粗提蛋白（BCF-P）并进行真空干燥浓缩,HeLa 细胞以中性红摄取试验鉴定其细胞空泡活性。兔离体壁细胞与Hp 及 BCF-P（100μg/ml）分别共孵育2、16 h 和1、12 h,应用14C-氨基比林(14C-AP)摄取法测定 Hp 和BCF-P 对组胺(1.0×10-4mol/L)刺激的壁细胞酸分泌的影响;同时应用 RT-PCR 方法分析 Hp 和BCF-P 对壁细胞 H+-K+ATP 酶α亚基 mRNA 表达的影响。结果 （1）BCF-P 中含有细胞空泡毒素（VacA）,对 HeLa 细胞表现出细胞空泡活性。（2）与 Hp 共孵育2 h 和16 h 均能抑制组胺刺激的壁细胞酸分泌（P＜0.05）,抑制作用随孵育时间延长而增强,2 h 抑制率为81%,16 h 为94%;BCF-P 作用1 h 和12 h,均能抑制壁细胞酸分泌（P＜0.05）,抑制作用也随孵育时间延长而增强,1 h 抑制率为24%,12 h 为58%。（3）尽管与 Hp 孵育2 h 能上调壁细胞 H+-K+ATP 酶α亚基 mRNA 表达（P＜0.05）,但孵育16 h 则表现为下调其表达（P＜0.05）;BCF-P 作用1 h 和12 h,均抑制 H+-K+ATP 酶α亚基 mRNA 的表达（P＜0.05）。结论 Hp 及其分泌的 VacA 可能通过下调壁细胞 H+-K+ATP 酶表达水平来抑制组胺刺激的壁细胞酸分泌。