基于Nrf2/HO-1通路的三七总皂苷对脑栓塞大鼠的保护机制

摘要

目的 研究三七总皂苷(PNS)对脑栓塞大鼠核因子E2相关因子(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)通路的影响及保护机制.方法 选取54只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、阳性药物组和PNS组(建模后腹膜下注射给药,PNS低、中、高剂量组分别按照每天50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg注射PNS),右侧颈内动脉注射月桂酸钠造模.假手术组、模型组、阳性药物组大鼠腹腔给生理盐水每天2 mL,PNS剂量组给予对应剂量的PNS,阳性药物组饲喂岩藻黄质每天50 mg/kg.评估大鼠神经功能,检测脑脊液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫荧光鉴定大鼠皮层神经元凋亡情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western Blot)测定脑组织Nrf2、Kelch样相关蛋白1(Keap1)、HO-1的mRNA和蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组SOD水平、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1 mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05).与模型组比较,阳性药物组及PNS中、高剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1 mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.05),PNS低剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、Keap1蛋白水平明显降低(P<0.05);阳性药物组及PNS中剂量组、高剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05),PNS低剂量组MDA水平、Nrf2和HO-1的mRNA水平明显升高(P<0.05).与阳性药物组比较,PNS高剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1 mRNA及蛋白表达明显降低,低剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1的蛋白水平明显降低(P<0.05);PNS高剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05),PNS低剂量组MDA水平、Keap1蛋白水平明显升高(P<0.05).与PNS低剂量组比较,PNS高剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1的mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.05),PNS中剂量组神经功能评分、MDA水平、神经元凋亡比例明显降低(P<0.05);PNS高剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05),PNS中剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1蛋白水平明显升高(P<0.05).与PNS中剂量组比较,PNS高剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1 mRNA水平明显降低(P<0.05),HO-1 mRNA、Nrf2和HO-1的蛋白水平明显升高(P<0.05).结论 PNS能够下调脑栓塞大鼠Nrf2/HO-1通路,降低组织氧化应激,抑制神经元凋亡,发挥神经保护作用.