西洛他唑对海马神经干细胞糖氧剥夺性损伤的影响及其作用机制

摘要

目的 探讨抗血小板药西洛他唑对糖氧剥夺诱导海马神经干细胞(NSCs)损伤的保护作用,以及活化转录因子4(ATF-4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路与西洛他唑保护性作用的关系.方法 采用分离培养的新生C57BL/6幼鼠海马NSCs建立糖氧剥夺性NSCs损伤模型.将NSCs随机分为对照组、模型组、西洛他唑组、siRNA空白对照组、ATF-4 siRNA组.在接受糖氧剥夺3 h和药物作用24 h后,CCK-8法检测海马NSCs的增殖活力,免疫印迹法(Western Blotting)检测ATF-4、CHOP、Bax、Bcl-2蛋白表达量,采用针对NSCs标志分子巢蛋白(Nestin)的免疫荧光检测鉴定NSCs.结果 免疫荧光检测显示分离培养的海马NSCs呈现典型Nestin阳性.CCK-8法检测和Western Blot检测结果显示,与对照组比较,模型组海马NSCs的增殖活力明显下降(P<0.01),Bax/Bcl-2、ATF-4和CHOP表达明显上调(P<0.01);高剂量西洛他唑组与模型组比较,ATF-4 siRNA组与SiRNA空白对照组比较,海马NSCs的增殖活力明显上调(P<0.01),凋亡指数Bax/Bcl-2、ATF-4和CHOP表达明显下调(P<0.01).结论 西洛他唑对糖氧剥夺诱导的海马NSCs损伤具有保护作用,其机制与抑制ATF-4、CHOP信号通路有关.