miR-146b-3p通过靶向BTG2基因调控肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究

摘要

目的:探讨miR-146b-3p对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测人正常肝细胞系L025和人不同肝癌细胞系Huh7、MHCC97-H、HCCLM3中miR-146b-3p的表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测B细胞易位基因2(BTG2)蛋白表达水平.在肝癌Huh7细胞中转染miR-146b-3p inhibitor干扰miR-146b-3p的表达,通过噻唑蓝(MTT)和Transwell实验分析干扰miR-146b-3p对Huh7细胞增殖、侵袭和迁移的影响.生物信息学和双荧光素酶报告基因实验检测miR-146b-3p和BTG2的靶向关系.功能恢复实验检测沉默BTG2对miR-146b-3p调控的Huh7细胞增殖、侵袭和迁移的影响.结果:与人正常肝细胞系比较,人肝癌细胞系Huh7、MHCC97-H、HCCLM3中miR-146b-3p的表达水平明显上调(P<0.05),BTG2的表达明显下调(P<0.05).干扰miR-146b-3p能够上调BTG2的表达.生物信息学预测显示BTG2可能是miR-146b-3p的直接靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实了二者的靶向关系.干扰miR-146b-3p能够抑制Huh7细胞增殖、侵袭和迁移.沉默BTG2能够逆转干扰miR-146b-3p导致的Huh7细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用.结论:干扰miR-146b-3p通过靶向上调BTG2的表达抑制肝癌Huh7细胞增殖、侵袭和迁移.