T细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化形成过程中细胞因子mRNA表达水平

摘要

目的研究刀豆蛋白A诱导下T细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型形成过程中细胞因子mRNA表达水平的变化.方法 Balb/c小鼠随机分为正常对照组、模型组.模型组小鼠静脉注射刀豆蛋白A15 mg/kg,每周1次,共20周,正常对照组给予等量生理盐水.于第1、5、12和20次注射后24 h分别处死8只小鼠,取肝脏组织低温保存,常规苏木精-伊红染色、果莫里法(Gomori)纤维染色及冰冻切片CD4+、CD8+T细胞染色.抽提小鼠肝脏组织总RNA,RT-PCR扩增肝组织IL-2、IL-4、IL-10、转化生长因子(TGF)-β1和β-肌动蛋白(β-actin)的mRNA,凝胶图像分析系统扫描扩增产物的灰度值,以β-actin作为内参照,计算细胞因子mRNA的相对表达量.结果模型组小鼠苏木精-伊红染色和Gomori染色提示实验中晚期发生肝纤维化,冰冻切片免疫组织化学染色提示肝组织内淋巴细胞浸润以CD4+细胞为主.IL-2mRNA水平仅在第1次注射后上升,随后迅速降低;IL-4、IL-10和TGF-β1mRNA表达水平则在模型形成过程中保持较高的表达水平.结论反复刀豆蛋白A刺激可以诱导T淋巴细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型的发生,IL-4、IL-10和TGF-β1等细胞因子mRNA在模型形成过程中持续高水平表达,在模型的发病过程中起着重要作用.