新的环境应答蛋白JWA在MCF-7细胞应答氧化应激中的表达

摘要

目的研究氧化应激诱导MCF-7细胞氧化损伤过程中,JWA表达的调节规律及其作用,尤其是与热休克蛋白(HSPs)间的关系.方法以不同浓度的H2O2(0.01、0.10、1.00mmol/L)分别处理MCF-7细胞10、30、60、180 min,建立MCF-7细胞氧化损伤模型并用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定;用四唑蓝(MTT)法分析H2O2对MCF-7细胞的相对细胞增殖率和细胞毒性的影响;采用Western-blot方法检测JWA、HSP70、HSP27和热休克转录因子(HSF1)蛋白表达水平的变化.结果H2O2对MCF-7细胞的增殖抑制和细胞毒性呈时间和剂量依赖关系,MCF-7细胞在最高剂量、最长处理时间(1.00mmol/L、180 min)时,细胞增殖几乎完全受抑制.H2O2活跃地调节JWA的表达,氧化损伤使JWA、HSP70和HSF1表达上调并呈剂量依赖关系,而且JWA、HSP70和HSF1的表达规律相似,而HSP27表达似乎与氧化应激的信号调节无关.结论在H2O2致MCF-7细胞氧化应激时,JWA作为有效的环境应答蛋白,其与HSP70共同参与的信号通路可能受HSF1调控.