硫化氢急性中毒大鼠肺组织氧化应激和Nrf2基因表达及乌司他丁的影响

摘要

目的研究硫化氢急性中毒大鼠肺组织氧化应激水平及核转录因子NF-E2相关因子2（nuclearfactorE2-relatedfactor 2,Nrf2）基因表达的变化及乌司他丁（ulinastatin,UTI）的影响。方法将96只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组（8只）、UTI对照组（8只）、硫化氢染毒组（40只）、UTI干预组（40只）。正常对照组和UTI对照组大鼠于染毒柜内吸入与硫化氢同样流量的空气1 h,UTI对照组大鼠立即腹腔注射UTI（10万U/kg）,2 h后处死。硫化氢染毒组和UTI干预组大鼠在染毒柜内吸入硫化氢（浓度为283.515 mg/m~3）1 h,UTI干预组大鼠立即腹腔注射UTI（10万U/kg）,两组大鼠分别于2、6、12、24、48 h处死,每组8只。检测肺组织中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化氢酶（GSH-Px）活力和谷胱甘肽（GSH）含量及Nrf2 mRNA的表达,观察肺组织病理学改变并行肺损伤评分。结果与正常对照组比较,2、6、12 h硫化氢染毒组大鼠肺组织中SOD、CAT活力和GSH含量及2、6、12、24h GSH-Px活力明显降低,差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）;2、6、12、24h硫化氢染毒组大鼠肺组织中MDA含量明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。与相应时间点硫化氢染毒组比较,UTI干预组6、12 h时GSH-Px活力,2、6、12 h时CAT活力,2、6、12、24 h时GSH含量及2、6、12、24、48 h时SOD活力明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）;UTI干预组2、6、12 h时MDA含量明显低于相应时间点硫化氢染毒组,差异有统计学意义（P＜0.01）。染毒后2、6、12、24 h,硫化氢染毒组肺组织中Nrf2mRNA表达（0.314±0.011、0.269±0.010、0.246±0.011、0.221±0.018）明显高于正常对照组（0.149±0.012）,差异有统计学意义（P＜0.01）;与相应时间点硫化氢染毒组比较,2、6、12、24、48 h UTI干预组的Nrf2 mRNA表达（0.383±0.017、0.377±0.014、0.425±0.017、0.407±0.011、0.381±0.010）明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.01）。光学显微镜下观察可见,硫化氢染毒组染毒后24 h大鼠肺组织损害明显,UTI干预组大鼠肺损伤较硫化氢染毒组有所减轻。UTI干预组12、24、48 h时肺损伤评分明显低于相应时间点硫化氢染毒组,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论氧化应激和Nrf2活化是参与硫化氢中毒急性肺损伤的重要因素,UTI能抑制氧自由基产生,纠正氧化还原失衡,上调Nrf2 mRNA表达水平,减轻氧化应激损伤,对肺组织损伤有保护作用。