人血浆中硫化氢测定的亚甲基蓝分光光度法

摘要

目的探讨人血浆中硫化氢（H2S）定性定量的分光光度法测定,为H2S中毒提供诊疗依据。方法血浆中的H2S经醋酸锌沉淀蛋白并形成硫化锌（ZnS）,加氢氧化钠（NaOH）溶液溶解变性蛋白,-18℃冰箱放置10 min,12 000 r/min高速离心10 min,弃去上清液,加0.2%N,N-二甲基对苯二胺于沉淀物中与ZnS作用,生成亚甲基蓝络合物,用UV-2600紫外分光光度仪,选择波长400~900nm进行测定,亚甲基蓝络合物在710 nm有最大吸收峰,根据其最大吸收峰特点和回归方程对H2S定性定量。结果血浆中H2S浓度在10.0~100.0μmol/L呈线性关系,回归方程为y=0.003 94x+0.025 4,其相关系数为0.999 6,回收率为77.8%~92.5%,相对标准偏差（RSD）为3.6%~4.7%;日内、日间RSD分别为3.1%~4.8%和3.8%~4.6%,最低检出限为5.0μmol/L。结论该方法操作简便,分析快速,结果准确,检测成本低,可为临床救治疑似H2S中毒患者提供诊疗依据。