圣草酚通过调节Nrf2通路促进氧化应激诱导的肝癌细胞的凋亡

摘要

目的:探究圣草酚对氧化应激诱导的肝癌细胞凋亡的作用机制.方法:CCK-8测定圣草酚对细胞的毒性.将Huh7细胞分为对照组、H2O2组、圣草酚组、H2O2+圣草酚组,分别用0.5 mmol/L H2O2或78 μmol/L圣草酚处理细胞48h;2,7-二氯荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)探针测定ROS的含量;试剂盒检测SOD和MDA水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测Nrf2、HO-1、NQO1蛋白相对表达水平.将裸鼠随机分为对照组、荜茇酰胺(PL)组、圣草酚组、PL+圣草酚组,每组8只;每天腹腔注射PL 2.5 mg/kg或圣草酚40 mg/kg治疗15 d,测定移植瘤体积和重量;DCFH-DA探针测定ROS的含量;试剂盒检测SOD和MDA水平;TUNEL染色检测细胞凋亡;Western blot检测Nrf2、HO-1、NQO1蛋白相对表达水平.结果:圣草酚呈剂量依赖性抑制HL-7702和Huh7细胞活性,圣草酚浓度78 μmol/L进行后续细胞实验.与H2O2组相比,H2O2+圣草酚组ROS水平和MDA含量显著上升,SOD活性显著下降,细胞凋亡率显著升高,细胞核Nrf2、HO-1、NOQ1表达显著下调(P＜0.05).与PL组相比,PL+圣草酚组移植瘤体积和重量显著减小,ROS水平和MDA含量显著增加,SOD活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,细胞核Nrf2、HO-1、NOQ1表达显著下调(P＜0.05).结论:圣草酚促进氧化应激诱导的肝癌细胞和移植瘤细胞的凋亡,并抑制Nrf2通路激活.