金葡菌肠毒素C2的单克隆抗体制备、鉴定及初步应用

摘要

目的:制备抗金葡菌肠毒素C2(SEC2)的单克隆抗体(McAb),并建立SEC2检测方法.方法:以金葡菌培养液中纯化的SEC2为抗原,免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体;并对单克隆抗体的特性进行鉴定;利用纯化后的抗体建立了夹心ELISA定量检测SEC2方法,并进行了验证和初步应用.结果:筛选出4株稳定分泌抗SEC2抗体的杂交瘤细胞株,其免疫球蛋白亚类均为IgG1,除两株单抗的SEC2识别位点相同外,其余单抗均特异性识别SEC2的不同结合位点.建立的夹心ELISA定量检测法,特异性、灵敏度、重复性均较好,检测SEC2范围为0.5～20 ng/ml,回收率在97.8%～101%,变异系数为2%～5%.结论:本研究制备的抗SEC2的单克隆抗体,可用于建立了SEC2定量检测方法,为控制金葡素制品质量和金葡菌肠毒素研究提供了较实用的方法.