人ZP3 186S突变蛋白在毕赤酵母X33细胞中的表达

摘要

目的:利用毕赤酵母表达人ZP3 186S蛋白(23～348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料.方法:经PCR获得编码人ZP3(23～348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3.将ZP3 186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3 186S质粒.转染毕赤酵母X33细胞,用高浓度Zeocin筛选转染细胞,甲醇诱导目的蛋白分泌,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定人ZP3 186S蛋白.结果:pPICZα-hZP3 186S表达质粒经测序正确,并在毕赤酵母X33中能够高效表达.结论:毕赤酵母能够分泌性表达重组人ZP3 186S蛋白(23～348氨基酸),进一步研究其生物学活性为研制不孕症诊断试剂和免疫避孕疫苗提供实验材料.