二甲双胍抑制mTOR/HIF-α通路减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的Th7细胞反应

摘要

目的:探讨二甲双胍对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的保护作用及其对体内mTOR/HIF-1α通路及Th17细胞的影响.方法:以MOG35-55免疫雌性C57BL/6小鼠建立EAE模型.随机分为对照组、EAE组和二甲双胍(MET)治疗组,对不同组应用Knoz评分观察小鼠的神经功能评分.在发病高峰期应用流式细胞学检测方法检测各组脾细胞培养上清液中Th17细胞比例,ELISA方法检测上清液及血清中IL-17A浓度.qPCR方法检测小鼠脾中IL-17A、RORγt mRNA表达水平.应用WB方法检测小鼠脾中S6K的活化程度,应用WB和qPCR方法检测脾组织中HIF-1α蛋白表达和mRNA转录水平.结果:与EAE组相比,MET治疗组发病程度减轻(P<0.01);脾组织中Th17细胞比例降低(P<0.01),脾细胞培养上清及血清中IL-17A含量减少(P<0.01);脾组织中IL-17A、RORγt mRNA转录水平降低(P<0.01);EAE组较对照组S6K1磷酸化程度升高(P<0.01).MET治疗组较EAE组S6K1磷酸化程度减低(P<0.05).EAE组较对对照组HIF-1α表达增高(P<0.01).MET治疗组较EAE组HIF-1α表达降低(P<0.01).EAE组与对照组相比HIF-1αmRNA转录增加(P<0.01).MET治疗组与EAE组相比HIF-1αmRNA转录降低(P<0.01).结论:二甲双胍可以减轻EAE的疾病严重程度,其可能是通过抑制mTOR/HIF-1α通路从而抑制Th17细胞反应而对EAE小鼠起到保护作用.