兔眼玻璃体腔两性霉素B的高效液相色谱法测定

摘要

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法测定新西兰大白兔眼玻璃体腔两性霉素B.方法:兔眼玻璃体溶液两性霉素B标本100μL经过冷冻干燥后,加入乙腈-水(70:30)20 μL去蛋白,并溶解浓缩回收目标药物,13 000r·min-1离心5 min,取10 μL进样分析.色谱条件为流动相:乙腈-10 mmol·L-1磷酸二氢钠溶液(35:65),流速:0.20 mL·min-1,C18色谱柱,柱温:25℃,检测波长:410nm.结果:两性霉素B在3～500μg·L-1内线性关系良好(r=0.998 8),高、中、低3种浓度的方法回收率为99%～108%,绝对回收率为83%～93%;日内、日间RSD分别为3.1%～12.6%,3.8%～12.9%;检测灵敏度为1μg·L-1.结论:本方法适用于兔眼玻璃体腔两性霉素B的定量分析,过程简单,方法稳定,结果可靠.