神经干细胞移植对脑损伤大鼠整合素表达的影响

摘要

目的 探讨神经干细胞(NSCs)移植对大鼠创伤性脑损伤(TBI)整合素(integrin)表达的影响.方法 从E14大鼠胚胎分离NSCs,进行原代培养及传代培养;对NSCs进行诱导分化;采用免疫细胞化学技术对NSCs和其分化为神经元的表型进行鉴定.采用改良的Feeney法制备创伤性脑损伤模型.利用脑立体定位仪和微量注射泵进行NSCs脑内移植.采用免疫组织化学技术、免疫印迹技术和RT-PCR技术检测在移植后不同时间脑组织损伤区整合素的表达.结果在培养基中,NSCs呈球团状悬浮生长,Nestin表达阳性.用含10% 胎牛血清的培养基对NSCs进行体外诱导分化后第2d,多数细胞伸出突起,以后突起逐渐延长,分支增加.分化后第5d,部分细胞呈βIII-微管蛋白阳性.整合素阳性产物主要表达于细胞膜,呈棕黄色.在对照组及移植组均可见阳性细胞表达.在不同时间点,NSCs移植组移植点及其周围脑组织中整合素的mRNA表达均显著高于对照组 (P<0.01).整合素的蛋白表达结果和mRNA表达结果相一致.结论 移植NSCs至TBI大鼠损伤脑组织,在移植点周围脑组织中整合素的表达显著增加.