上调miR-200c通过抑制TGF-β1/Smad3通路减轻单侧输尿管梗阻小鼠肾纤维化

摘要

目的 观察miR-200c在单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)小鼠肾组织中的表达变化及其对UUO小鼠肾间质纤维化和TGF-β1/Smad3通路的影响.方法 45只C57BL/6J小鼠,随机数字表法分为假UUO组、UUO组、UUO+agomiR-200c组,每组15只.假UUO组仅游离左侧输尿管但不结扎;UUO组和UUO+agomiR-200c组通过结扎左侧输尿管建立的肾纤维化模型,手术后第1、7、14d两组小鼠分别给予生理盐水和agomir-200c尾静脉注射.第21d后处死全部小鼠,取血测定血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN).取小鼠梗阻侧肾脏组织,HE染色和Masson染色评价肾小管间质损伤和肾间质纤维化损伤程度,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肾组织miR-200c的表达,Western blotting检测肾组织TGF-β1、Smad3及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的表达.结果 与假UUO组比较,UUO组小鼠肾组织miR-200c的表达水平明显降低,血清Scr、BUN水平明显升高,肾小管间质损伤病理评分升高,肾胶原容积分数(cVF)增加,肾组织中TGF-β1、Smad3及α-SMA水平明显升高.与UUO组比较,UUO+agomiR-200c组小鼠肾组织miR-200c的表达明显增高,血清Scr、BUN水平明显降低,肾小管间质损伤病理评分下降,肾胶原容积分数减少,肾组织中TGF-βl、Smad3及α-SMA水平明显降低.结论 上调miR-200c能够通过抑制TGF-β1/Smad3通路减轻UUO小鼠肾间质纤维化.