微生物源性抗氧化剂对diquat诱导的小鼠肝脏氧化应激、内质网应激和功能的影响

摘要

目的以diquat诱导的小鼠氧化应激为模型, 研究微生物源性抗氧化剂（MA）对小鼠肝脏氧化应激、内质网应激、细胞凋亡和功能的影响。方法选择体质量16～18 g的C57BL/6雌性小鼠18只, 随机分为3组, 每组6只。抗氧化剂组小鼠灌胃MA, 对照组和模型组小鼠灌胃等量等渗盐水, 饲养22 d后, 模型组和抗氧化剂组腹腔注射diquat溶液, 对照组小鼠注射等量等渗盐水, 处理3h后处死小鼠采集肝组织。肝脏组织制成10%匀浆后, 依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）活性, 用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。肝脏组织制成10%匀浆后, 依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）活性, 用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果过氧化氢在对照组、模型组、抗氧化剂组分别为（8.74±1.38）、（11.44±1.01）、（9.81±0.98）mmol/g, 组间比较差异有统计学意义（F = 7.640, P ＆ 0.05）。对照组、模型组和抗氧化剂组MDA的含量分别为（0.65±0.07）、（0.86±0.18）、（0.70±0.05）nmol/mg, 组间比较差异有统计学意义（F = 5.406, P ＆ 0.05）。模型组AST活性为（146.68±4.29）U/g, 显著高于对照组的（125.64±15.69）U/g与抗氧化剂组的（126.57±1.82）U/g, F = 6.192, P ＆ 0.05。实时定量PCR结果显示, 与对照组相比, 模型组蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）和活化转录因子6（ATF6）基因相对表达量显著升高, 分别为1.880±0.442和1.800±0.380（F值分别为7.702、10.815, P值均＆ 0.05）;与模型组相比, 抗氧化剂组PERK和ATF6基因相对表达量显著降低, 分别为1.310±0.333、1.180±0.204（P值均＆ 0.05）。细胞凋亡相关基因表达结果显示, 抗氧化剂组caspase3和caspase8基因相对表达量分别为1.136±0.381、1.593±0.407, 与模型组的1.572±0.127和2.843±0.973相比, 显著降低（F值分别为12.800、7.657, P值均＆ 0.05）。结论微生物源性抗氧化剂减弱diquat诱导的小鼠肝脏氧化应激、内质网应激和肝细胞凋亡, 改善肝脏功能。