全长乙型肝炎病毒基因组的扩增及序列分析

摘要

目的建立一种全长乙型肝炎病毒(HBV)基因组扩增及序列分析的新方法.方法在HBV负链开环缺口处设计引物,使用TaKaRa LA TaqTM DNA聚合酶进行扩增,聚合酶链反应产物克隆后进行全长序列测定.结果用此方法成功获得HBV全基因组DNA序列.将已知序列的HBV全基因组重组质粒作为模板进行敏感性和保真性测定,其敏感性为102个初始模板,核苷酸的人为突变率为1.2 bp/kb.结论此方法可用于大规模HBV全基因组扩增和序列分析,为HBV的基础和临床研究提供了一种新方法.