小干扰RNA下调Notch2对肝细胞癌HepG2细胞增殖的影响

摘要

目的研究小干扰RNA（siRNA）干扰Notch2对HepG2细胞增殖的影响。方法用siRNA干扰HepG2细胞中Notch2基因,用RT-PCR检测siRNA干扰后Notch2 mRNA与下游靶基因Hes1 mRNA的表达水平,用Western blot方法检测Notch2蛋白的改变情况,然后用CCK8法测定HepG2细胞增殖情况,用析因设计的方差分析和组间t检验进行统计学比较。结果肝细胞癌HepG2细胞中Notch2 mRNA高表达,Notch2-siRNA干扰抑制后,HepG2细胞的Notch2 mRNA和蛋白水平下调,下游Hes1的mRNA表达水平降低。HepG2细胞在Notch2-siRNA处理组12、24、48、72h和96h的增殖抑制率分别为2.64%±16.20%、38.34%±8.80%、70.05%-7.80%、70.78%±10.00%和74.22%±4.80%,对照组siRNA处理的细胞增殖抑制率分别为-0.21%±3.65%、11.61%±10.66%、22.11%±7.93%、7.64%±10.00%和4.18%±7.64%,两组比较,F=5.48,P＜0.01,差异有统计学意义。与对照组相比,24h后增殖差异均有统计学意义（t值分别为3.405、7.473、7.749和13.460,P值均＜0.05）。结论 Notch2在体外培养的肝细胞癌HepG2细胞中高表达,下调Notch2可以减缓HepG2细胞的增殖,为Notch2的靶向干预作为肝细胞癌的治疗提供了有价值的实验依据。