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微小RNA-100靶向成纤维生长因子受体调控胰腺癌细胞的增殖

         

摘要

目的探讨微小RNA(miR)-100对成纤维生长因子受体3(FGFR3)调控及其对胰腺癌细胞增殖的影响。方法采用实时PCR检测17对胰腺癌和癌旁组织中miR-100的表达水平。应用CCK名试剂盒检测过表达miR-100对胰腺癌细胞株增殖的影响。利用分子生物学技术构建FGFR3的野生型及突变型3′-UUTR报告基因,分析miR-100对FGFR3的调控作用,然后采用实时PCR和蛋白印迹检测过表达miR-100对FGFR3 mRNA和蛋白表达水平的影响。应用CCK-8、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Edu)探讨特异性敲低FGFR3对胰腺癌细胞株增殖的影响。结果 miR-100在胰腺癌组织中呈低表达水平(P<0.05)。过表达miR-100可显著抑制胰腺癌细胞的增殖(P<0.05)。报告基因分析显示miR-100能够显著下调FGFR3的野生型3′-UTR报告基因的荧光表达(P<0.05),而对突变型报告基因和空白对照组的荧光表达影响不大。实时PCR和蛋白印迹检测显示miR-100可显著抑制FGFR3的mRNA和蛋白表达(P<0.05)。特异性敲低FGFR3后明显抑制胰腺癌细胞的增殖(P<0.05)。结论 miR-100可通过调控FGFR3表达来抑制胰腺癌细胞的增殖,从而在胰腺癌中发挥抑癌基因的功能。

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