骨髓增生异常综合征患者凋亡造血细胞的克隆性初步研究

摘要

目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者凋亡造血细胞的克隆性来源.方法经过G带或R带染色体核型分析,确定骨髓细胞有异常克隆存在的MDS患者共19例,其中10例取骨髓分离有核细胞制备离心涂片.同步进行DNA末端原位杂交(ISEL)及相应异常染色体的间期荧光原位杂交(FISH)(简称ISEL/FISH法).计数有核细胞中异常克隆细胞百分比和凋亡细胞中异常克隆细胞百分比.4名正常人8张离心涂片经Fas单抗孵育诱导凋亡后行FISHL/ISEL检测作为方法学对照.另9例患者骨髓有核细胞经膜联蛋白V(Annexin V)及碘化丙锭(PI)标记染色细胞,流式细胞术分选PI-、Annexin V+PI-、Annexin V-PI-细胞,离心涂片后再行FISH检测(简称FCM/FISH法).结果10例经ISEL/FISH分析的MDS患者骨髓有核细胞中异常克隆细胞百分比平均为37.1%,凋亡细胞中异常克隆细胞百分比仅为24.0%.正常人经Fas单抗诱导的凋亡细胞核型不变.9例经FCM/FISH分析者,8例显示凋亡细胞中核型正常百分比高于非凋亡细胞.结论MDS凋亡细胞主要来源于残余正常造血细胞.