慢病毒介导TFF3基因转染A549细胞对NF-κB表达的影响

摘要

目的 探讨核因子(NF)-κB在慢病毒转染过表达及沉默三叶因子(TFF)3基因的人非小细胞肺癌A549细胞中的表达意义.方法 慢病毒包装TFF3基因全长片断及TFF3短发卡RNA质粒,病毒液转染A549细胞,获得稳定过表达及沉默TFF3表达的A549细胞株,实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹法检测TFF3、NF-κB、B细胞淋巴瘤基因(Bcl)-2、细胞周期蛋白(Cyclin)D1基因及蛋白的表达水平.结果 过表达TFF3的A549细胞(TFF3)中TFF3基因较对照组增高(655±135)倍,蛋白水平较Vec组显著增高;沉默TFF3基因的A549细胞(shTFF3)沉默TFF3效率约为75％,蛋白水平也较shCK组明显降低(均P<0.01).TFF3组NF-κB、Bcl-2、CyclinD1 mRNA及蛋白表达水平明显高于Vec组(P<0.05),shTFF3组NF-κB、Bcl-2、CyclinD1 mRNA及蛋白水平较shCK组明显降低(P<0.01).结论 TFF3的表达与NF-κB密切相关,过表达TFF3能够激活NF-κB,促进CyclinD1和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制了细胞凋亡,促进肺癌细胞恶性发展.