结核分支杆菌与非结核分支杆菌快速鉴别的实验研究

摘要

目的探讨提供一种从菌种水平快速检测和鉴别分支杆菌的方法.方法应用三对分别对应于分支杆菌(分子量65 000)表面抗原、结核分支杆菌插入序列IS6110及人类β-珠蛋白基因的部分序列的特异性寡核苷酸引物对受试菌种及临床标本中的DNA进行多重PCR扩增,其扩增产物分别为439 bp、268 bp及123 bp,并对439 bp进行BstEⅡ和HaeⅢ两种限制性内切酶消化,同时,将135例临床标本进行培养、涂片,和多重PCR联合限制性片段长度多态性分析(mPCR-RFLP)检测.结果mPCR-RFLP方法可将12种受试的标准菌种分别区分到种及亚种水平.本方法在临床实验中亦体现出较高的灵敏性及特异性.结论mPCR-RFLP分析是对结核分支杆菌与非结核分支杆菌进行菌种分类鉴定的一种快速有效的方法.