老龄兔骨髓间充质干细胞体外培养影响因素的研究

摘要

目的 研究体外培养老龄兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的影响因素.方法 以密度梯度离心技术及贴壁筛选法相结合,在体外分离检测MSCs表面CD29、CD34、CD44、CD45的表达;诱导分化反向证明部分细胞可分化为成骨细胞及脂肪细胞,具有分化潜能,鉴定该细胞群为干细胞.细胞记数法计算MSCs倍增时间;观察供体自然老龄情况下,不同换液时间、不同血清浓度、不同种植密度等因素对MSCs生长的影响.结果 MSCs CD29和CD44表达阳性,不表达造血干细胞标志CD34和CD45.高密度接种(3×106～4×106个/cm2),低浓度(8%～10%)血清的低糖DMEM培养,在体外可保持MSCs未分化增殖状态,并获得纯度较高同源性较好的干细胞群,高浓度血清(20%)并不加速细胞生长,而促进分化.结论 MSCs具有体外多分化潜能,老龄供体骨髓中MSCs的生长、增殖特性受不同换液时间、不同血清浓度及不同种植密度等因素的影响.