骨髓间充质干细胞对持续缺氧心肌保护作用的研究

摘要

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)保护持续缺氧心肌的作用及可能机制.方法 体外培养成年大鼠MSCs和乳鼠心肌细胞,在培养的乳鼠心肌细胞加入MSCs或其条件培养液,在无氧(95%N2+5%CO2)条件下共培养24、48和72 h,采用Hoechst33258染色细胞核,计算凋亡细胞百分率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化.结果 缺氧可以诱导心肌细胞凋亡,培养24、48和72 h凋亡率分别为(26.5±6.1)%,(20.2±6.4)%和(51.6±2.4)%,与 MSCs共培养,心肌细胞凋亡率显著减低,分别为(7.3±4.7)%,(4.3±2.4)%和(15.1±5.4)%(P＜0.05);与其条件培养液共培养24和48 h,心肌细胞凋亡率与对照组比较无明显降低,分别为(23.9±4.1)%和(20.7±2.5)%(P＞0.05),共培养72 h,心肌细胞凋亡率为(24.2±4.2)%(P＜0.05),显著低于对照组.蛋白质免疫印迹显示凋亡时心肌表达Bax水平较高,与MSCs或其条件培养液共培养72 h后,Bax表达水平呈不同程度降低,与心肌细胞凋亡发生率减低一致,Bcl-2无明显变化.结论 MSCs在体外对持续缺氧心肌细胞具有一定程度的抗凋亡作用,其机制可能通过细胞间直接接触和旁分泌细胞因子,影响Bcl-2家族部分蛋白在心肌细胞的表达.