荧光法测定醛糖还原酶活性的优化

摘要

目的 找出优化NADP生成荧光法测定红细胞醛糖还原酶 (AR) 活性的方案.方法 通过研究血红蛋白浓度、激发荧光水浴时间以及NADP溶液贮存时间对荧光强度的影响,优化红细胞AR活性测定的NADP生成法;以此方法测定正常及糖尿病大鼠AR活性.结果 NADP生成法的精确度受血红蛋白影响,在终止反应后的NADP溶液中加入250 μl 6%高氯酸沉淀血红蛋白可消除此影响;水浴激发荧光时间5、30、60 min,荧光值变异系数无差异;在激发荧光前将反应体系生成的NADP溶液贮存于-20℃的条件下至少可以稳定保存4 w.糖尿病大鼠AR活性明显高于正常对照组(P<0.05). 结论优化的NADP生成法可以更准确测定红细胞AR活性.