脑通汤含药血清对缺氧/复氧大鼠海马神经元抗氧化应激相关指标的影响

摘要

目的 探讨脑通汤通过海马神经元抗氧化应激治疗血管性痴呆(VD)的机制.方法 培养大鼠原代海马神经元及鉴定,取培养9d的神经元,随机分为正常细胞组、缺氧/复氧模型组、正常血清组、脑通汤大、中、小剂量含药血清组.除正常细胞组以外,各组均置入(95％ N2 +5％CO2)混合气体的三气培养箱缺氧24 h再复氧2h造模.采用MTT法检测缺氧24 h和复氧2h时间点海马神经元活性并计算细胞存活率;实时荧光定量PCR法检测海马神经元核因子-E2-相关因子(Nrf)2、血红素氧合酶亚型(HO)-1、醌氧化还原酶(NQO)1 mRNA的表达.结果 MTT显示:缺氧24h:模型组的海马神经元活性及存活率较正常细胞组明显下降(P＜0.05),与正常血清组及脑通汤不同剂量含药血清组比较无明显差异(P＞0.05).复氧2h:脑通汤不同剂量含药血清组均较模型组明显升高(P＜0.05),正常血清组较模型组无明显差异(P＞0.05).实时荧光定量PCR结果显示:脑通汤含药血清能够促进缺氧/复氧海马神经元抗氧化应激相关基因Nrf2、HO-1、NQO1的表达(P＜0.05),并且脑通汤含药血清大剂量组与中剂量组的上述3个基因水平明显高于缺氧/复氧模型组(P＜0.01).结论 脑通汤可通过上调抗氧化相关基因Nrf2、HO-1、NQO1的表达,减轻海马神经元缺氧/复氧损伤的氧化应激反应,从而保护大鼠海马神经元缺氧/复氧损伤.