pEGFP-N1-NUCB2真核表达质粒的构建及在SH-SY5 Y细胞中的转染效率

摘要

目的 构建pEGFP-N1-NUCB2重组子并比较Lipofectamine 2000和Xfect两种转染试剂在进行神经细胞转染时的转染效率.方法 构建pEGFP-N1-NUCB2重组子,然后采用碱裂解法进行质粒DNA的提取,PEG-MgCl2进行质粒DNA的纯化,最后将纯化的质粒DNA分别用两种不同转染试剂分别在HEK293细胞和SH-SY5Y细胞中进行转染.结果 采用Lipofectamine 2000进行pEGFP-N1-NUCB2重组子的转染实验,发现在HEK293细胞中可以转染成功,但是在SH-SY5Y细胞中基本没有荧光显现;采用Xfect进行pEGFP-N1-NUCB2重组子的转染实验,发现在SH-SY5Y细胞中虽有荧光显现,但是转染效率非常低.结论 Xfect的转染效率高于Lipofectamine 2000,pEGFP-N1-NUCB2在SH-SY5Y细胞中采用脂质体进行转染很难成功.