SH-SY5Y

摘要： The noble gas argon has the potential to protect neuronal cells from cell death.So far,this effect has been studied in treatment after acute damage.Preconditioning using argon has not yet been investigated.In this study,human neuroblastoma SH-SY5Y cells were treated with different concentrations of argon(25%,50%,and 74%;21%O2,5%CO2,balance nitrogen)at different time intervals before inflicting damage with rotenone(20μM,4 hours).Apoptosis was determined by flow cytometry after annexin V and propidium iodide staining.Surface expressions of Toll-like receptors 2 and 4 were also examined.Cells were also processed for analysis by western blot and qPCR to determine the expression of apoptotic and inflammatory proteins,such as extracellular-signal regulated kinase(ERK1/2),nuclear transcription factor-κB(NF-κB),protein kinase B(Akt),caspase-3,Bax,Bcl-2,interleukin-8,and heat shock proteins.Immunohistochemical staining was performed for TLR2 and 4 and interleukin-8.Cells were also pretreated with OxPAPC,an antagonist of TLR2 and 4 to elucidate the molecular mechanism.Results showed that argon preconditioning before rotenone application caused a dose-dependent but not a time-dependent reduction in the number of apoptotic cells.Preconditioning with 74%argon for 2 hours was used for further experiments showing the most promising results.Argon decreased the surface expression of TLR2 and 4,whereas OxPAPC treatment partially abolished the protective effect of argon.Argon increased phosphorylation of ERK1/2 but decreased NF-κB and Akt.Preconditioning inhibited mitochondrial apoptosis and the heat shock response.Argon also suppressed the expression of the pro-inflammatory cytokine interleukin-8.Immunohistochemistry confirmed the alteration of TLRs and interleukin-8.OxPAPC reversed the argon effect on ERK1/2,Bax,Bcl-2,caspase-3,and interleukin-8 expression,but not on NF-κB and the heat shock proteins.Taken together,argon preconditioning protects against apoptosis of neuronal cells and mediates its action via Toll-like receptors.Argon may represent a promising therapeutic alternative in various clinical settings,such as the treatment of stroke.

摘要： Neuroblastoma(NB)is the most common extracranial solid tumor of childhood.It accounts for 8%–10%of all malignant tumors in children^([1])and results in a heavy burden to the life and health of children.NB is a complex disease,and its occurrence is related to exposure to environmental risk factors.

摘要： 目的研究六味地黄丸含药血清对Aβ诱导SH-SY5Y细胞的自噬影响及其机制,探讨阿尔茨海默病的病理机制及补肾填精法的作用机制。方法30只大鼠随机分成对照组和六味地黄丸组两组,分别予以等量的双蒸水和含六味地黄丸粉末水溶液进行灌胃,末次灌胃结束后取血并分离血清备用。将SHSY5Y细胞分为对照组、模型组和药物组,对照组和模型组给予含空白血清的完全培养液,药物组给予含含药血清的完全培养液,模型组和药物组加入Aβ1-42寡聚体,培养48 h。应用CCK-8法对各组进行细胞增殖率分析;免疫荧光法分析各组细胞内Aβ沉积情况;Western Blot法检测各组细胞BACE1、p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达情况。结果CCK-8结果显示,与对照组相比,模型组细胞增殖率显著降低(P<0.01);与模型组相比,药物组细胞增殖率显著增高(P<0.01)。与对照组相比,模型组细胞内Aβ的沉积显著增加(P<0.01);与模型组相比,药物组细胞内的Aβ沉积显著减少(P<0.01)。Western Blot结果显示,与对照组相比,模型组细胞的BACE1、Beclin1的蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值显著升高(P<0.01),p62的蛋白表达量显著降低(P<0.01);与模型组相比,药物组细胞的Beclin1的蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值显著升高(P<0.01),BACE1和p62的蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论六味地黄丸含药血清可以增加Aβ诱导的SH-SY5Y细胞自噬相关基因的表达,上调自噬水平,减轻细胞损伤,对细胞具有明显的保护作用。

摘要： Objective:To identify the molecular mechanisms of the effects of the Buyin Qianzheng formula(BYQZF)on the mitochondrial dynamics in a Parkin overexpression Parkinson's disease(PD)cell model.Methods:First,a stable Parkin overexpression cell model was constructed using plasmid transfection.Then,we examined the protective effect of BYQZF on the mitochondrial dysfunction of the Parkin overexpression PD cell model induced by neurotoxin 1-methyl-4-phenylpyridinium ion(MPPþ).The mRNA expression level of Parkin was evaluated using real-time quantitative PCR.The cell survival rate was detected using the Cell Counting Kit-8 assay.We evaluated the cellular adenosine triphosphate(ATP)levels using luciferase assays.A laser scanning confocal microscope was used to observe the mitochondrial morphology,activity,and mitochondrial membrane potential(DJm).Western blot was conducted to evaluate the levels of the fusion proteins mitofusin1,mitofusin2,optic atrophy 1,dynaminrelated protein 1,and mitochondrial fission protein 1.Results:Parkin overexpression attenuated MPPþ-induced mitochondrial damage,increased mitochondrial activity and DJm.BYQZF increased the survival of MPPþ-induced cells that overexpressed Parkin and upregulated the mitochondrial form factor and activity.It also inhibited a decrease in the DJm and ATP levels.These findings suggested that BYQZF protected against MPPþ-induced mitochondrial dysfunction and enhanced the protective effect of Parkin overexpression.Furthermore,the formula upregulated the expression of the fusion proteins mitofusin1,mitofusin2,and optic atrophy 1(closely related to mitochondrial quality remodeling),and reduced the expression of the fission protein dynamicrelated protein 1,as well as mitochondrial fission protein 1.Conclusion:The mechanism by which BYQZF increased the mitochondrial protective effect of Parkin gene overexpression in MPPþ-induced cells may be related to improving mitochondrial function and regulating the balance of mitochondrial division and fusion proteins.

摘要： 鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种广泛表达的具有生物活性的鞘脂,在细胞分化、迁移、增殖、代谢和凋亡中发挥重要作用。S1P可以激活多种信号通路,其中的一些能够引发细胞质中的Ca信号,但很少有研究关注S1P引发神经元Ca信号的机制。在本研究中,我们发现S1P可以在SH-SY5Y细胞和海马神经元中引发Ca信号。去除细胞外的钙离子在很大程度上消除了S1P诱导的细胞内Ca增加,表明细胞外Ca的内流是这一过程的主要贡献者。此外,我们发现S1P诱导的Ca信号不依赖于G蛋白偶联的S1P受体或者表皮生长因子的反式激活。TRPC6的抑制剂SAR7334抑制了S1P诱导的钙信号,表明TRPC6通道充当S1P的下游效应器。使用膜片钳记录,我们发现S1P可以激活TRPC6电流。两种Src酪氨酸激酶抑制剂Src-I1和PP2可以显著抑制S1P对TRPC6的激活。总之,我们的数据表明S1P以一种Src依赖性方式激活TRPC6通道,进而诱导SH-SY5Y细胞和海马神经元中的Ca信号。

摘要： 目的通过观察神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)线粒体形态、功能及细胞凋亡的发生情况,探究唑啉化合物2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉(2-BFI)对氟化钠(NaF)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。方法用不同浓度NaF(0.5、1.0、1.5、2.0、4.0 mmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h,用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞增殖能力;用NaF和不同浓度的2-BFI(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L)处理24 h,用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞增殖能力。应用透射电镜观察线粒体形态,用ATP检测试剂盒、线粒体红色荧光探针(TMRM)试剂盒检测线粒体功能,用TUNEL染色法检测细胞凋亡的发生情况,用蛋白印迹法检测Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平。结果SH-SY5Y细胞存活率随NaF浓度的升高而逐渐下降,选定NaF后续实验浓度为2.0 mmol/L(P<0.01);2-BFI治疗24 h可以提高细胞存活率,在10 mmol/L时,细胞存活率较高,为99.169%,当浓度高于10 mmol/L时细胞存活率随之下降,选定10 mmol/L为2-BFI后续实验浓度。与对照组相比,NaF组线粒体形态改变,ATP水平和线粒体膜电位(Δψm)下降,细胞凋亡率上升,Bcl-2蛋白含量减少,Bax、cleaved caspase-3蛋白表达增高;与NaF组相比,2-BFI给药组线粒体形态改善,ATP水平和Δψm升高,细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白含量升高,Bax、cleaved caspase-3蛋白表达降低。结论2-BFI可以改善SH-SY5Y细胞线粒体形态及功能、减少SH-SY5Y细胞凋亡,从而对氟中毒发挥神经保护作用。

摘要： 目的 探讨黄杞苷对H2O2诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用与分子机制.方法 黄杞苷(5、10、20、40、80和160μmol·L-1)预处理SH-SY5Y细胞12 h,MTT法检测黄杞苷对H2O2诱导损伤后细胞活力的影响;通过氮蓝四唑(NBT)法总超氧化物歧化酶(SOD)活力检测试剂盒和总谷胱甘肽过氧化物酶(NADPH)检测试剂盒测定黄杞苷对H2 O2诱导损伤后SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响;通过流式细胞术对SH-SY5Y细胞进行活性氧(ROS)水平的测定.黄杞苷(20μmol·L-1)预处理SH-SY5Y细胞12 h,H2O2孵育6、12和24 h或用黄杞苷(5、10和20μmol·L-1)预处理细胞12 h,H2O2孵育12 h,采用Western blot法分别检测Nrf2及HO-1表达情况.结果 与模型组比较,黄杞苷能够提高SH-SY5Y细胞的活力,显著提高SOD和GSH水平,减少ROS产生(P<0.05).黄杞苷能够促进Nrf2蛋白由细胞质向细胞核内转移,黄杞苷(20μmol·L-1)预处理SH-SY5Y细胞12 h时转移达到顶峰.H2O2损伤模型下,黄杞苷浓度依赖性地促Nrf2的核内转移(P<0.05),并促进下游蛋白HO-1的表达(P<0.05).结论 黄杞苷对H2 O2诱导SH-SY5 Y细胞损伤具有保护作用,其作用机制与抗氧化,促进Nrf2、HO-1的表达有关.

摘要： 目的:研究远志正丁醇提取物对SH-SY5Y细胞的增殖作用及对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用.方法:增殖实验以0(对照组)、5、10、20、40、80和100μg/mL的远志正丁醇提取物培养SH-SY5Y细胞48 h,观察细胞形态,用MTT法测算存活率.损伤实验重取细胞并随机分为空白组、对照组、实验组和损伤模型组.实验组以10、20和40μg/mL的远志正丁醇提取物预培养实验组SH-SY5Y细胞24 h,观察细胞形态后,与模型组各加入H2O2至终浓度为150μmol/L孵育,1 h后观察细胞的形态,测算存活率.结果:增殖实验中,100μg/mL以下各组药物浓度均能促进正常SH-SY5Y细胞的增殖,5μg/mL,10μg/mL的药物浓度组与对照组相比,有显著性差异(P<0.05).损伤实验中,与损伤模型组相比,各浓度组的细胞存活率有所上升,其中10μg/mL浓度下的细胞存活率明显较高(P<0.05).结论:远志正丁醇提取物在一定浓度内有促进SH-SY5Y细胞增殖及抗H2O2诱导的氧化损伤的功效.

摘要： 目的:研究远志正丁醇提取物对SH-SY5Y细胞的增殖作用及对H_(2)O_(2)诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用。方法:增殖实验以0(对照组)、5、10、20、40、80和100 μg/mL的远志正丁醇提取物培养SH-SY5Y细胞48 h,观察细胞形态,用MTT法测算存活率。损伤实验重取细胞并随机分为空白组、对照组、实验组和损伤模型组。实验组以10、20和40 μg/mL的远志正丁醇提取物预培养实验组SH-SY5Y细胞24 h,观察细胞形态后,与模型组各加入H_(2)O_(2)至终浓度为150 μmol/L孵育,1 h后观察细胞的形态,测算存活率。结果:增殖实验中,100 μg/mL以下各组药物浓度均能促进正常SH-SY5Y细胞的增殖,5 μg/mL,10 μg/mL的药物浓度组与对照组相比,有显著性差异(P<0.05)。损伤实验中,与损伤模型组相比,各浓度组的细胞存活率有所上升,其中10 μg/mL浓度下的细胞存活率明显较高(P<0.05)。结论:远志正丁醇提取物在一定浓度内有促进SH-SY5Y细胞增殖及抗H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤的功效。

摘要： 目的 探讨毛壳菌素影响神经母细胞瘤SH-SY5Y增殖和迁移的机制.方法 应用DMSO作为对照,与毛壳菌素分别与SH-SY5Y细胞进行孵育,应用荧光定量PCR(RT-qPCR)和WB检测毛壳菌素的靶分子HIF-1α的mRNA相对表达水平以及蛋白表达水平.采用流式细胞术和CCK8实验检测细胞的增殖,利用Transwell试验检测细胞的迁移能力.采用流式细胞术和WB检测JAK2-STAT3信号通路的活化情况.结果 人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中HIF-1α的mRNA相对表达量为1.68±0.06,显著高于人正常胶质细胞(0.98±0.05,均P＜0.001),SH-SY5Y细胞系HIF-1α的WB检测的蛋白水平相对灰度值为1.81±0.04,显著高于人正常胶质细胞(0.97±0.06,均P＜0.001).毛壳菌素孵育后的SH-SY5Y细胞的Ki-67-high的占比为(35.89±7.23)％,显著低于DMSO对照组[(76.81±5.12)％,P＜0.01];Ki-67的平均荧光强度为573.7±80.25,显著低于DMSO对照组(1522±53.41,P＜0.001).CCK8检测细胞的增殖能力,毛壳菌素组在16h,24h和48h的OD450nm值分别为0.25±0.06,0.30 ±0.02,0.38±0.03,显著低于对照组(0.40±0.05,0.56±0.02,0.77±0.05,P＜0.01).迁移实验结果表明,DMSO对照组的迁移能力显著高于毛壳菌素组,细胞数分别为22816 ±4267.2和68172±9733.5,P＜0.001.WB分析JAK2和STAT3的磷酸化水平,毛壳菌素孵育细胞的p-JAK2和p-STAT3的蛋白相对表达水平显著低于DMSO对照组,差异具有统计学意义(P ＜0.001).流式细胞术分析SH-SY5Y细胞的p-JAK2和p-STAT3所占的比例及平均荧光强度,毛壳菌素组显著低于DMSO对照组,差异具有统计学意义(P＜0.01).WB和流式细胞术分别检测IL-6与毛壳菌素共同孵育后的JAK和STAT3的磷酸化水平,IL-6能够逆转毛壳菌素对JAK2和STAT3磷酸化的抑制作用.结论 毛壳菌素可能通过抑制HIF-1α,抑制JAK2-STAT3信号通路的活化,从而抑制神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的增殖和迁移.

摘要： 本发明公开了一种ABCDRIS天然五色五味五馅及制作的五色五味饺子。所述的一种ABCDRIS天然五色五味五馅及制作的五色五味饺子是以：猪里脊肉、虾仁、鸡胸脯肉、鸡蛋白、荠菜、小葱、芦笋、大红菇、千张、黑木耳、香菇、淡虾皮、核桃仁、白芝麻、西芹、大豆油、芒果肉、香焦肉、大青枣肉(台湾产)、蜂蜜。调料类有味精、精碘盐、白糖、十三香、胡椒粉、香油等食物原料为内馅。利用瞬闪、纳米科技工艺制作而成，鱼虾馅、禽肉馅、菌藻馅、蔬菜馅、水果馅、五种不同口味的全营养组合食品，五色五味五馅平均搭配食用，既能当早餐主食又能当中晚餐与点心食用。ABCDRIS天然五色五味组合食品是现代营养科学结合现代医学科学为基本原理，食物采用了多样化，多色化，低动脂，微胆固醇，高纤维，微碱性的科学配比的全营养平衡天然五色五味组合食品，高度利用了食物多样多色化互补，大大提高了食物的生理价值，绝对控制了动物性脂肪与胆固醇，提高了高纤维微碱性食物的配比量，是一种完美的健康食品，特有风味，五味平均搭配食用使全营养平衡摄入，达到健康目的。

摘要： 本发明提供了一种短梗五加提取液、短梗五加提取液的应用和短梗五加饮料及其制备方法，涉及食品饮料技术领域，该提取液主要由短梗五加干果依次经过酒制、煎煮和榨汁制备而成。经酒制后煎煮榨汁的短梗五加，其有效成分溶出更多，具有更好的提高人体免疫力，调节血脂的功效，对各种亚健康人士具有很好的保健作用，可广泛应用于制备果酒、饮料、糖果、调味剂或保健食品。由该短梗五加提取液、甜菊糖苷、柠檬酸、柠檬酸钠、黄原胶和羧甲基纤维素制得的短梗五加饮料中短梗五加提取液含量在90％以上，有效缓解了现有的短梗五加饮料普遍为多组分调配饮料，短梗五加成分含量不高的问题。同时，该短梗五加饮料酸甜适口，具有浓郁的短梗五加风味。

摘要： 本发明公开了五级钛机械件成型方法、五级钛表壳成型方法以及五级钛表壳。上述五级钛机械件成型方法，包括如下步骤：S1、将五级钛材料进行开料；S2、将所述五级钛材料进行清洗；S3、将所述五级钛材料置于温度550°C‑750°C条件下保温80min‑200min；S4、将所述五级钛材料采用热压机进行成型，成型温度800°C‑1000°C、成型压力150吨‑250吨；S5、将所述五级钛材料进行清洗；五级钛表壳由上述的方法制成。本发明所述五级钛机械件成型方法，加工成本较低、加工周期较短。

摘要： 本发明属于物质鉴别技术领域，提供了一种五峰五倍子蜂蜜的判别模型的构建方法及五峰五倍子蜂蜜的鉴别方法。本发明的构建方法包括：测定蜂蜜的矿物质元素的含量；所述矿物质元素包括Na、Mg、Al、K、Ca、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Se、Mo、Ag、Cd、Sb、Ba、Tl和Pb；所述蜂蜜包括五峰五倍子蜂蜜和非五峰五倍子蜂蜜；基于蜂蜜的产地‑种类和矿物质元素的含量，进行逐步判别分析，得到判别模型；所述判别模型为以产地‑品种为因变量，矿物质元素含量为自变量的方程。本发明利用逐步判别分析进行建模和拟合，得到的判别模型能够准确鉴别五峰五倍子蜂蜜和非五峰五倍子蜂蜜。

摘要： 本发明提供一种五水合五羟基十三硼酸钡和五水合五羟基十三硼酸钡非线性光学晶体及制备方法和用途，所述该化合物的化学式为Ba2B13O19(OH)5·5H2O，分子量为894.33，采用水热法制成；该晶体的化学式为Ba2B13O19(OH)5·5H2O，分子量为894.33，属于三斜晶系，空间群为P1，晶胞参数为a=7.5929(4)Å，b=8.0892(4)Å，c=10.0221(5)Å，α=89.943(2)°，β=72.402(2)°，γ=81.196(2)°，单胞体积为579.17(5)Å3，晶体的倍频效应约为KH2PO4(KDP)的1.0倍，紫外截止边约为200 nm，采用水热法或室温溶液法生长晶体，该晶体的化学稳定性好，可作为紫外非线性光学晶体在全固态激光器中获得应用。

摘要： 本发明公开了一种综合提取五味子中的五味子多糖、五味子总木脂素和五味子总皂苷的方法及其应用，提取方法包括水提取、多糖的提取和纯化、闪式醇提、总木脂素的提取和纯化、总皂苷的提取和纯化。本发明通过往水提醇沉后的五味子粗多糖中加入硫酸铵溶液，可有效去除蛋白等大分子杂质，离心后的上清液用透析袋在去离子水中透析可去除小分子杂质，得到高纯度五味子多糖；通过将水提醇沉上清液和醇提液合并去醇后上大孔树脂，水洗后用低浓度乙醇洗脱，能有效去除非目标成分，使醇洗所得到的目标成分含量进一步提高，经过大孔树脂纯化后可得较高含量的木脂素和总皂苷的混合物，方便后续纯化；本发明的方法资源利用高，提取效率高，应用前景广阔。

摘要： 本发明公开了五级钛机械件成型方法、五级钛表壳成型方法以及五级钛表壳。上述五级钛机械件成型方法，包括如下步骤：S1、将五级钛材料进行开料；S2、将所述五级钛材料进行清洗；S3、将所述五级钛材料置于温度550°C‑750°C条件下保温80min‑200min；S4、将所述五级钛材料采用热压机进行成型，成型温度800°C‑1000°C、成型压力150吨‑250吨；S5、将所述五级钛材料进行清洗；五级钛表壳由上述的方法制成。本发明所述五级钛机械件成型方法，加工成本较低、加工周期较短。

摘要： 本发明公开了一种可切换三至五轴模式的五轴五联动数控系统，该数控系统包括可以同时切换的XY平台切换模式和三轴、四轴、五轴切换模式，这两个切换模式的结合使得数控系统能够实现六种模式。采用上述数控系统的三轴三联动数控机床可以实现四轴四联动和五轴五联动的功能，还能够通过XY平台的切换以实现陶瓷和玻璃的高速精密切削。

摘要： 本发明属于植物成分提取与应用领域，尤其涉及一种五加参口服液及五加参中提取刺五加总苷的方法。本发明采用高压提取工艺提取五加参中的刺五加总苷，并采用聚酰胺树脂与大孔吸附树脂分离纯化工艺进一步纯化刺五加总苷；本发明刺五加口服液中仅含有具有增强抗疲劳能力的药物组分，有效活性成分含量高，杂质少，避免了传统中成药饮品中非有效成分潜在的致敏危险，以及复杂的药物成分给服用者肝肾带来的负担及损伤，制备出更具有针对性的高效低毒的保健饮品，通过保健饮品中各药物多糖的配伍使服用者的抗疲劳能力获得了更全面的增强。

摘要： 本发明属于植物成分提取与应用领域，尤其涉及一种刺五加总黄酮注射液及从五加参中提取刺五加总黄酮的方法。本发明采用高压提取工艺提取五加参中的刺五加总黄酮，并采用聚酰胺树脂与大孔吸附树脂分离纯化工艺进一步纯化刺五加总黄酮；本发明分离提取方法在室温下进行，减少了对药物活性成分的破坏，得到的提取物具有更好的药用活性，且提取时间短、效率高、操作简便、节约能源、对环境污染小、刺五加总黄酮的得率及纯度高、可用于工业化大批量生产。利用本发明提取方法由五加参中提取的刺五加总黄酮为原料制备的刺五加总黄酮注射液，异常毒性小，安全性高，且品质稳定，有效成分活性高。