腹膜透析液对大鼠腹膜间皮细胞血管内皮生长因子及其受体表达的影响

摘要

目的 观察不同浓度葡萄糖腹膜透析液(dextrose)、艾考糊精腹膜透析液(icodextrin)对大鼠腹膜间皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体VEGFR1、VEGFR2、sFlt-1合成的影响.方法 分离、培养SD雄性大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs),第二代细胞用于实验研究.实验分为5组,分别以不同腹膜透析液〔1.50％dextrose(低糖组)、2.50％dextrose(中糖组)、4.25％dextrose(高糖组)、7.50％icodextrin组(糊精组)〕进行刺激培养,无血清DMEM为阴性对照(对照组).RT-PCR法检测VEGF及其受体VEGFR1、VEGFR2、sFlt-1 mRNA表达,Western印迹法检测RPMCs的VEGFR1、VEGFR2蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中VEGF及sFlt-1表达.结果 各组均见VEGFR1、VEGFR2、sFlt-1 mRNA和蛋白表达.在核酸和蛋白水平,中糖组、高糖组VEGFR1表达明显高于低糖组、糊精组及对照组(P<0.01,P<0.05);中糖组、高糖组VEGFR2表达显著低于低糖组、糊精组及对照组(均P<0.01);低糖组VEGFR2蛋白表达显著低于对照组(P<0.01).在核酸水平,中糖组、高糖组VEGF、sFlt-1表达明显高于对照组(P<0.01);RPMCs培养上清液中,VEGF、sFlt-1蛋白表达强弱趋势与RT-PCR一致.结论 正常培养的RPMCs表达VEGFR1、VEGFR2及sFlt-1.腹膜透析液,尤其是高浓度dextrose,能明显上调VEGF、VEGFR1及sFlt-1的表达,但下调VEGFR2的表达,提示其可通过调节VEGF受体从而调节VEGF系统,这可能是导致长期腹膜透析过程中腹膜血管增生的机制之一.icodextrin的生物相容性可能优于高浓度dextrose.