circ_POLA2靶向miR-330-5p对脑胶质瘤细胞生长及转移能力的影响

摘要

目的探讨circ_POLA2对脑胶质瘤细胞生长及转移能力的影响及其可能作用机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测脑胶质瘤组织与癌旁组织中circ_POLA2、miR-330-5p的表达量;Pearson法分析脑胶质瘤组织中circ_POLA2、miR-330-5p表达量的相关性;体外培养人脑胶质瘤细胞T98G,si-NC、si-circ_POLA2、miR-NC、miR-330-5p mimics、si-circ_POLA2与anti-miR-NC、si-circ_POLA2与anti-miR-330-5p分别转染至T98G细胞(si-NC组、si-circ_POLA2组、miR-NC组、miR-330-5p组、si-circ_POLA2+anti-miR-NC组、si-circ_POLA2+anti-miR-330-5p组);CCK-8实验检测细胞增殖;氧化酶法检测葡萄糖消耗量;比色测定法检测乳酸生成量;划痕实验、Transwell小室实验别检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验与RIP实验检测circ_POLA2与miR-330-5p的靶向关系;Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,脑胶质瘤组织中circ_POLA2表达量明显升高,miR-330-5p表达量明显降低(P<0.05);circ_POLA2与miR-330-5p呈负相关(r=-0.8964,P<0.001);与si-NC组比较,si-circ_POLA2组细胞活力、划痕愈合率、MMP-2、MMP-9蛋白水平、葡萄糖消耗量和乳酸生成量明显降低,侵袭细胞数明显减少(P<0.05);circ_POLA2能够靶向结合miR-330-5p;与miR-NC组比较,miR-330-5p组细胞活力、划痕愈合率、MMP-2、MMP-9蛋白水平、葡萄糖消耗量和乳酸生成量明显降低,侵袭细胞数明显减少(P<0.05);与si-circ_POLA2+anti-miR-NC组比较,si-circ_POLA2+anti-miR-330-5p组细胞活力、划痕愈合率、MMP-2、MMP-9蛋白水平、葡萄糖消耗量和乳酸生成量明显升高,侵袭细胞数明显增多(P<0.05)。结论干扰circ_POLA2表达可能通过靶向miR-330-5p而降低糖酵解水平进而抑制脑胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭。