菌毒清提取物诱导人鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2凋亡及其机制

摘要

目的探讨菌毒清提取物对人鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2凋亡的影响及其分子机制。方法体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2,分别用1.0、2.0和3.0 mg/ml菌毒清提取物处理,分为对照组(未处理),1.0、2.0、3.0 mg/ml组(菌毒清处理),采用CCK8法检测各组CNE-1、CNE-2细胞活力;划痕、Transwell检测不同浓度的菌毒清提取物对CNE-1、CNE-2细胞迁移和侵袭能力的影响;流式细胞术分析不同浓度的菌毒清提取物对CNE-1、CNE-2细胞凋亡率的影响;Western印迹法检测Bcl-xl、Mcl-1、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表达水平的变化;荧光定量PCR检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-xl、髓样细胞白病蛋白(Mcl)-1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8和Caspase-9相关分子mRNA表达水平的变化。结果不同浓度的菌毒清提取物处理后,与对照相比,显著抑制CNE-1、CNE-2细胞活力,且随着浓度增加,细胞活力逐渐降低(P<0.05);明显抑制CNE-1、CNE-2细胞发生迁移和侵袭(P<0.05);明显促进细胞凋亡(P<0.05);Bcl-xl、Mcl-1表达明显下降,Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9表达明显升高(P<0.05)。结论菌毒清提取物显著抑制CNE-1、CNE-2细胞活力、迁移和侵袭能力;促进CNE-1、CNE-2细胞凋亡,其促进凋亡的作用机制可能与细胞凋亡内源性途径相关。