法舒地尔对大鼠颈动脉球囊损伤后血管内膜新生的抑制作用

摘要

目的研究法舒地尔对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜的干预影响,并探讨可能的机制。方法 30只雄性SD大鼠,随机分为5组:（1）假手术组:不做球囊损伤;（2）球囊损伤组仅作球囊损伤;（3）2.5 mg组:球囊损伤后服法舒地尔2.5 mg·kg-1·d-1;（4）5.0 mg组:球囊损伤后服法舒地尔5.0 mg·kg-1·d-1;（5）10 mg组:球囊损伤后口服法舒地尔10.0 mg·kg-1·d-1。14 d后光镜和苏木精伊红染色法（HE）染色观察新生内膜的内膜中膜比值;以免疫组化方法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,并计算积分光吸光度（IA）;酶联免疫吸附（ELISA）法测定组织中氧化应激标志物8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）和丙二醛（MDA）的水平。用免疫印迹（Western blot）法测定磷酸化和非磷酸化的Ras、丝裂原活化蛋白激酶（MEK1/2）、细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）的蛋白表达。结果与假手术组血管内膜与中膜比值（0.22±0.01）比较,球囊损伤组新生内膜明显增生（2.71±0.23）;与球囊损伤组相比较,法舒地尔2.5 mg组（1.72±0.24）、5.0 mg组（1.23±0.11）、10.0 mg组（0.85±0.12）呈剂量依赖抑制新生内膜的增殖,差异有统计学意义（F=767.3,P＜0.01）。法舒地尔以剂量依赖形式抑制PCNA的表达,IA值球囊损伤组为（53.42±2.30）,与2.5 mg（45.25±1.62）、5.0 mg组（22.55±0.88）、10.0 mg组（1 9.61±0.79）比较,差异有统计学意义（均P＜0.01）。氧化应激标志物8-OHdG、MDA法舒地尔干预各组与球囊损伤组比较下降,差异有统计学意义（均P＜0.01）;与球囊损伤组Ras表达0.62±0.10比较,法舒地尔干预各组剂量由低至高依次为0.49±0.12、0.39±0.1 3、0.20±0.23,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）;球囊损伤组MEK1/2为0.56±0.10、ERK1/2为0.64±0.13,法舒地尔干预各组剂量由低至高依次为0.35±0.14、0.29±0.09、0.11±0.12与0.48±0.15,0.32±0.08,0.12±0.09,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）,法舒地尔抑制Ras磷酸化的MEK1/2、ERK1/2的蛋白表达。结论法舒地尔通过抑制氧化应激和失活Ras-MEK1/2 ERK1/2通路抑制大鼠颈动脉球囊损伤后再狭窄形成。