肝细胞生长因子受体在血管平滑肌细胞增殖凋亡中的表达

摘要

目的 研究球囊扩张术后血管平滑肌细胞(VSMCs)中肝细胞生长因子(HGF)及其受体(c-Met)mRNA表达的变化,明确HGF受体与VSMCs增殖凋亡分子机制的相关性.方法 用逆转录聚合酶链式反应检测36只兔腹主动脉球囊损伤前后不同时间点VSMCs中c-Met的mRNA表达水平;体外实验将选择性c-Met蛋白抑制剂NK-4作用于兔VSMCs,运用MTT分别于0、24、48及72 h检测细胞增殖状态;流式细胞仪观察NK-4对细胞凋亡的影响,进一步采用Western blot检测药物作用前后细胞周期蛋白(Cyclin D1)、凋亡蛋白(Bcl-2)的表达.结果 球囊损伤后VSMCsc-Met mRNA的表达水平明显高于正常VSMCs(P＜0.01),平均为对照组2.42倍;对照组S及G2/M期DNA百分含量与处理组比值分别为1.31,1.62(P＜0.01),NK-4呈时间、剂量依赖性方式抑制VSMCs增殖,促进其凋亡.72 h时对照组与NK-4(1.0 mg/L)处理组Cyclin D1、Bcl-2表达水平比值分别为2.37和3.81(P＜0.01),故两者表达水平随NK-4作用时间延长而下降.结论 c-Met在球囊扩张术后血管平滑肌细胞中高表达可能在VSMCs过度增殖、凋亡受阻中起重要作用.选择性c-Met蛋白抑制剂NK-4可能通过Cyclin D1,Bcl-2影响VSMCs的增殖与凋亡,提示c-Met抑制剂可作为预防血管成形术后再狭窄新的候选药物.