小G蛋白基因重组腺病毒转染乳鼠心肌细胞实验研究

摘要

目的 研究含有小G蛋白基因Rad重组腺病毒在体外转染乳鼠心肌细胞后的转染效率及表达.方法 构建Rad腺病毒载体,分别以感染复数5、10、15和20转染体外培养的乳鼠心肌细胞,48 h后,采用荧光显微镜观察转染后荧光强度,流式细胞仪检测转染率.以感染复数为20转染后分3组:空白对照组,阴性对照组和Rad过表达组,3 d后,采用RT-PCR、Western blot检测Rad基因表达情况.结果感染复数5、10、15和20对应转染率分别为29.84%、69.69%、77.20%和84.81%.腺病毒转染3 d后,Rad过表达组心肌细胞Rad基因 mRNA和蛋白表达水平较空白对照组和阴性对照组显著增加(P<0.05).结论 外源性Rad基因可在乳鼠心肌细胞中稳定表达.