抗胃癌MG7单链抗体与重组超抗原SEB融合蛋白在体内外对胃癌细胞的杀伤作用研究

摘要

目的研究 SEB-scFv 融合蛋白对胃癌的抑制作用。方法在体外通过 MTT 法观察SEB-scFv 融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用;DNA ladder 法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响;在电子显微镜下观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化;流式细胞仪分析胃癌细胞凋亡率。采用胃癌动物模型观察治疗后肿瘤重量和存活时间。结果胃癌细胞的增殖抑制率随 SEB-scFv 融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大,且对不表达 MG7相关抗原的肿瘤细胞不表现杀伤效应;1.0μg/ml和10μg/ml 高浓度融合蛋白组 DNA 凝胶电泳呈现明显的梯状条带;在电子显微镜下可观察到被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的胃癌细胞表现出典型的凋亡特征性变化;融合蛋白0.1 μg/ml、1.O μg/ml、10 μg/ml 组细胞 G0/G1期前有明显的凋亡峰出现,三者的凋亡率分别达到51.62%、54.21%和61.55%,而生理盐水组凋亡率仅为1.44%,差异具有统计学意义（P＜0.05）。融合蛋白治疗组大鼠移植瘤的瘤重明显低于其他各组（P＜0.05）,抑瘤率高达61.3%,其生存时间为（31.7±2.1）d,存活时间延长达54.6%。结论 SEB-scFv 融合蛋白作为一种新的抗肿瘤生物制剂有明显的抑癌效应。