肼屈嗪对人胃癌细胞株RUNX3基因甲基化及其表达的调节作用

摘要

背景:甲基化所致的抑癌基冈RUNX3表达沉默是胃癌发生的重要机制,以脱甲基化制剂恢复其表达可起到抗肿瘤作用.目的:研究脱甲基化制剂肼屈嗪对人胃癌细胞株RUNX3基因甲基化及其表达的调节作用,观察肼屈嗪对胃癌细胞生长和凋亡的影响.方法:分别以RT-PCR和甲基化特异性PCR(MSP)检测肼屈嗪和5-Aza-dC处理前后SGC7901、MKN28和MGC803细胞的RUNX3 mRNA表达及其甲基化状态.以MTT法检测MKN28细胞增殖活性,以流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡.结果:MKN28细胞存在甲基化所致的RUNX3基因表达沉默.40 μmol/L肼屈嗪作用72 h后,MKN28细胞可扩增出RUNX3非甲基化条带,呈部分脱甲基化,RUNX3 mRNA恢复表达.但相对表达量低于5-Aza-dC组(P<0.05).10 μmol/L以上浓度的肼屈嗪对MKN28细胞生长具有抑制作用,可使细胞周期阻滞于GO/G1期,并诱导细胞凋亡(P<0.05).结论:肼屈嗪可通过脱甲基化恢复RUNX3基因表达并能抑制MKN28细胞生长,诱导细胞凋亡.有必要对肼屈嗪在胃癌治疗中的作用作进一步研究.