丙型肝炎病毒E2结合蛋白1结合蛋白的酵母双杂交筛选研究

摘要

目的应用酵母技术筛选丙型肝炎病毒(HCV)7包膜蛋白E2结合蛋白1(E2BP1)的结合蛋白.方法应用酵母双杂交系统3,构建E2BP1诱饵质粒,转化酵母AH109,与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合,于涂有x-α-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长,对于阳性克隆的插入基因片段序列进行测定,并进行生物信息学分析.结果53个阳性克隆测序,结果与GenBank数据库进行初步比较.其中6个克隆为未知功能基因,其余47个均与己知基因的序列高度同源(90%～100%).这47个己知基因包括人类酶原颗粒蛋白16、人类染色体序列、人类乙酰辅酶A转乙酰酶1(ACAT1)、人类4-羟基苯丙酮酸二加氧酶、人类硒蛋白Pl(SEPP1)、人类组织蛋白酶F(CTSF)、人类prosaposin(PSAP)、人类金属硫蛋白2A等16种.结论HCVE2BP1结合蛋白的酵母双杂交技术筛选为进一步研究E2BP1蛋白相互作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定了基础.