高糖环境基质细胞衍生因子-1对巨噬细胞基质金属蛋白酶-9及血管内皮生长因子表达的影响

摘要

目的探讨高糖环境下基质细胞衍生因子-1（SDF-1）对巨噬细胞生物学功能的影响及其机制。方法体外建立RAW264.7巨噬细胞系,细胞计数试剂盒（CCK-8）检测SDF-1对巨噬细胞的毒性。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测高糖（22.5 mmol/L）和正常糖（5.5 mmol/L）对巨噬细胞相关蛋白表达的影响。实验分组:A组（对照）、B组（SDF-1）、C组（磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B通路抑制剂:LY294002）、D组（SDF-1+ LY294002）,Transwell实验检测巨噬细胞的迁移能力,Western blot检测各组相关蛋白的表达变化。两组间比较采用非配对t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 CCK-8实验结果显示,各组间比较差异无统计学意义（F=0.464,P＆0.05）。高糖组巨噬细胞SDF-1、血管内皮生长因子（VEGF）、SDF-1的特异受体（CXCR4）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达低于正常糖组（SDF-1、VEGF、CXCR4、MMP-9组间比较,t=50.510、11.020、27.660、55.350,均P＆0.05）。Transwell实验中,A、B、C、D组迁移巨噬细胞数分别为（86.630±4.096）、（144.300±5.044）、（59.000±2.646）、（65.670±4.256）个。与A组比较,B组及C组差异有统计学意义（t=21.460、5.574,均P＆0.05）。此外,SDF-1可以增加巨噬细胞CXCR4、PI3K、蛋白激酶B（Akt）、MMP-9、VEGF的表达,而LY294002可以减少上述蛋白的表达（Western blot检测各蛋白,B组:CXCR4、PI3K、Akt、MMP-9、VEGF组间比较,t=44.690、5.393、4.640、13.250、8.551,均P＆0.05;C组:PI3K、Akt、MMP-9、VEGF组间比较,t=13.430、5.287、4.381、45.510,均P＆0.05）。结论高糖环境可以影响巨噬细胞SDF-1、VEGF、CXCR4及MMP-9的表达,SDF-1可能通过上调PI3K/Akt通路促进巨噬细胞分泌MMP-9及VEGF。