NOTCH抑制剂DAPT对颅脑损伤大鼠神经保护作用及其机制

摘要

目的探讨NOTCH抑制剂DAPT对颅脑损伤大鼠神经保护作用及其机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和DAPT组。模型组和DAPT组大鼠采用自由落体法建立颅脑外伤模型,假手术组不做颅脑损伤。DAPT组大鼠经颅内注射DAPT 50 μg/只,假手术组和模型组大鼠经颅内注射等体积生理盐水;治疗2周后,采用神经行为学评分评价3组大鼠神经功能状态;采用蛋白质免疫印迹（Western blot）分析3组大鼠脑组织Notch通路蛋白表达水平;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）分析3组大鼠脑组织炎性因子水平;采用活性氧（ROS）试剂盒和JC-1试剂盒检测3组大鼠脑组织ROS水平和线粒体膜电位。组间比较采用单因素方差分析。结果 DAPT组大鼠神经功能评分[（4.81±0.61）分]明显低于模型组[（8.79±1.88）分],差异有统计学意义（t=3.110,P＆0.05）。DAPT组大鼠脑组织Notch1、Delta 1和NICD表达水平（0.76±0.18、0.99±0.14、0.64±0.15）明显低于模型组（1.64±0.27、2.09±0.35、1.42±0.11）,差异有统计学意义（t=2.528、2.107、2.081,P＆0.05）。DAPT组大鼠脑组织炎性因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6和IL-1β水平[（98.12±7.65）、（78.22±8.19）、（69.28±7.25） pg/ml]明显低于模型组[（198.43±12.65）、（128.44±10.38）、（98.55±5.90） pg/ml],差异有统计学意义（t=7.120、5.891、4.882,P＆0.05）。DAPT组大鼠脑组织ROS水平（501.44±29.45）明显低于模型组（747.33±45.28）,差异有统计学意义（t=6.912,P＆0.05）。DAPT组大鼠脑组织线粒体膜电位（17.35±2.76）明显高于模型组（10.38±2.09）,差异有统计学意义（t=4.817,P＆0.05）。结论 DAPT可显著抑制Notch信号通路,降低颅脑损伤大鼠脑组织炎性因子、ROS和提高线粒体膜电位,进而保护颅脑损伤大鼠的神经功能。