微小RNA-150在胆囊癌上皮-间充质转化中的作用及其机制

摘要

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-150与胆囊癌肿瘤上皮-间充质转化(EMT)的关系及其作用机制.方法 实时定量聚合酶链反应(qPCR)法检测河北医科大学第二医院2018年1月至2019年5月手术切除的30例胆囊癌肿瘤组织中miR-150的表达,以30例慢性胆囊炎组织为对照;qPCR法同时检测组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-9的mRNA表达,分析miR-150与这些基因的关系.应用miR-150 mimics转染人胆囊癌细胞株GBC-SD,划痕实验及Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭的改变;qPCR及蛋白质印迹法(Western blot)技术检测各基因mRNA和蛋白的变化.两样本均数比较采用t检验.多样本均数比较时采用方差分析,方差分析后续的两两比较采用最小显著差异法(LSD).两样本之间相关性比较采用线性相关分析.结果 胆囊癌组织中miR-150和E-cadherin的mRNA表达均低于慢性胆囊炎组织(t=-7.035、-14.146,P＜0.01);PCNA、N-cadherin、MMP-9的mRNA与慢性胆囊炎组织比较均明显增强(t=3.813、9.339、5.616,P＜0.01).miR-150表达与患者的肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(t=3.228、2.396、-2.604,P＜0.05).Pearson相关分析显示,miR-150与E-cadherin呈正相关(r=0.630,P＜0.05),与PCNA、N-cadherin、MMP-9表达呈负相关(r=-0.769、-0.628、-0.616,P＜0.05).转染miR-150 mimics后GBC-SD细胞的迁移侵袭能力减弱(F=1 965.860、114.940,P＜0.01);转染后PCNA、N-cadherin、MMP-9表达降低,而E-cadherin表达增高(P＜0.05).结论 胆囊癌组织中miR-150表达降低是肿瘤进展的因素,其机制可能在于miR-150通过调节一些基因表达参与肿瘤EMT过程.