晚期氧化蛋白产物抑制CD4＋CD25－T细胞向CD4＋CD25＋调节性T细胞转化

摘要

目的探讨晚期氧化蛋白产物（AOPP）对CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞（Tregs）转化的影响及机制。方法将CD4+CD25-T细胞按1×106/孔培养于平底96孔板,依据是否加入AOPP分为3组:对照组（加入人血清白蛋白200 μg/ml）;AOPP组（加入AOPP 200 μg/ml）;抗氧化组（DPI 100 μmol/L预处理1 h后再加入AOPP 200 μg/ml）。流式细胞仪检测各组细胞表型变化和DHE荧光强度,3H-TdR掺入法检测Tregs对效应T细胞（Teff）的免疫抑制功能,Western blot法检测细胞内磷酸化信号转导与转录激活因子5（p-STAT5）的变化。结果 AOPP组中CD4+CD25+T细胞占（28.6±4.5）%、胞内因子Foxp3在CD4+CD25+T细胞中的表达率为（10.7±1.7）%,显著低于对照组细胞的相应值（73.8±10.7）%、（64.3±9.4）% （P=0.003,0.001）;抗氧化组细胞表型分别为（41.3±6.4）%、（22.3±3.0）%,转化较AOPP组多（P=0.049,0.004）,低于对照组（P=0.011,0.002）。在Tregs∶Teff为1∶1的情况下,AOPP组Teff的每分钟脉冲数值（CPM）为17 521.0±1 703.8,显著高于对照组的9 932.3±1 142.9（P=0.003）;抗氧化组的Teff的CPM为15 709.7±1 272.9,高于对照组（P=0.004）,但与AOPP组比较差异无统计学意义（P=0.214）。AOPP组DHE荧光强度为（163.0±11.5）%,较对照组（51.1±4.0）%高（P=0.000）;而抗氧化组DHE荧光强度（113.4±7.8）%较AOPP组低（P=0.003）,高于对照组（P=0.000）。AOPP组p-STAT5表达较对照组低（P=0.006）;而抗氧化组p-STAT5表达较AOPP组显著性上调（P=0.008）,但仍低于对照组（P=0.043）。结论 AOPP抑制CD4+CD25-T细胞向Tregs转化,其机制可能是通过氧化应激下调p-STAT5的表达。