Ki67基因短发夹状RNA表达载体对肾癌细胞生长的抑制作用

摘要

目的研究针对Ki67基因的短发夹状RNA（shRNA）表达载体pSilencer-Ki67对人肾癌细胞生长的抑制作用。方法将pSilencer-Ki67转染人肾癌786-0细胞,24、48、72、120、144 h后分别采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot技术检测Ki67 mRNA、蛋白表达,噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖,原位末端标记法检测细胞凋亡。结果pSilencer-Ki67转染后48 h 786-0细胞Ki67mRNA表达（34．1±1．7）%、蛋白表达（42．6±1．7）%降低最明显,与空质粒对照组[（97．7±0．9）%、（97．3±1．6）%]比较差异均有统计学意义（P＜0．01）。pSilencer-Ki67处理后48 h细胞增殖抑制率（76．7±3．2）%最高,72 h凋亡细胞阳性率（74．3±5．9）%最高,与空质粒对照组[（7．0±0．5）%、（8．4±1．1）%]比较差异有统计学意义（P＜0．01）。pSilencer-Ki67的这些作用可持续144 h。结论pSilencer-Ki67能有效、持续抑制人肾癌786-0细胞生长,有望成为肾癌基因治疗的有效工具。