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黄芩苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞体外分化为胰岛素分泌细胞

摘要

目的体外诱导大鼠骨髓间质干细胞(BMSCs)分化为胰岛样细胞。方法采用分步法体外诱导后,间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞nestin、胰岛素蛋白表达;RT-PCR法检测诱导前后胰岛转录因子mRNA表达;EHSA检测诱导后细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌。结果免疫荧光染色显示诱导5 h,nestin阳性细胞为(44.6±7.3)%。诱导24 h,nestin阳性细胞增至(61.8±8.4)%。此后,nestin阳性细胞数目开始下降,诱导第14天后,nestin表达基本消失;同时诱导后的细胞可以表达胰岛素蛋白。另一方面,RT-PCR结果显示诱导后细胞可以表达胰岛素-1、葡萄糖转运子-2及其转录因子mRNA。ELISA结果显示不同浓度的葡萄糖刺激的胰岛素分泌量不同,5 mmol/L和25mmol/L葡萄糖刺激的胰岛素分泌量分别为(25.53±6.49)和(53.26±7.56)mU/L,而诱导前MSCs不具备上述特点。结论大鼠BMSCs体外可以诱导成为胰岛素分泌细胞。

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