巨噬细胞移动抑制因子小干扰RNA对肝癌细胞表达血管内皮生长因子的抑制效应

摘要

目的观察巨噬细胞移动抑制因子（MIF）小干扰RNA（siRNA）对肝癌细胞表达血管内皮生长因子（VEGF）的影响。方法Western blot检测MIF和VEGF在肝癌和癌旁组织的表达情况;人工化学合成MIF siRNA和对照siRNA,将其转染PLC、HepG2肝癌细胞株,定量聚合酶链反应（PCR）和Western blot检测MIF和VEGF mRNA及其蛋白的表达。结果MIF、VEGF mRNA和蛋白在肝癌组织中高表达。MIF siRNA（50、100 nmol/L）转染肝癌细胞株后,PLC细胞MIF和VEGFmRNA水平分别下调（78.8±7.2）%、（90.4±2.9）%和（60.6±2.6）%、（79.8±1.2）%;HepG2细胞MIF和VEGF mRNA水平分别下调（74.3±8.9）%、（88.4±4.6）%和（65.6±4.6）%、（80.7±2.2）%。MIF蛋白分别下调（57.3±3.4）%、（78.7±1.2）%和（54.8±6.8）%、（77.9±2.3）%,并呈剂量依赖关系;伴随MIF mRNA和蛋白的表达下调VEGF蛋白分别下调（52.6±12.9）%、（87.4±2.3）%和（52.4±11.1）%、（68.5±2.8）%,亦呈剂量依赖关系,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,两干预组间的差异也有统计学意义（P＜0.05）。结论MIF siRNA能特异性阻断PLC及HepG2细胞MIF mRNA和MIF蛋白的表达,并且同时有效下调VEGF mRNA及其蛋白的表达,MIF可能通过调控VEGF基因和蛋白的表达,参与肿瘤血管的生成和促进肿瘤细胞的转移。