人骨肉瘤组织热休克蛋白gp96-肽复合物的提取、纯化与鉴定

摘要

目的从人骨肉瘤组织中提取、纯化热休克蛋白（HSP）gp96-肽复合物的方法。方法采用三步蛋白纯化法从15例人骨肉瘤患者肿瘤组织中提取、纯化HSPgp96-肽复合物。SDS-PAGE、Western blot鉴定HSPgp96-肽复合物,应用改良的Bradford计算蛋白得率。结果应用该方法提取的蛋白质经SDS-PAGE和Western blot特异性鉴定,证实是HSPgp96-肽复合物;蛋白得率为每g湿重骨肉瘤组织可纯化HSPgp96-肽复合物30～40μg/g。结论三步蛋白纯化法不仅操作简便、重复性高,而且提取的HSPgp96-肽复合物具有高获率、高纯度、高特异性等特点。