一种改良大鼠肝细胞分离和原代培养技术

摘要

目的探讨并改进大鼠肝细胞分离和培养技术。方法Ⅲ型胶原预铺培养板,改良原位胶原酶两步灌流法分离肝细胞,适宜密度接种,含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养;观察细胞产量、活率、贴壁和生长情况评价方法的可行性。结果肝细胞分离时间明显缩短;胶原酶用量减少1/3;每鼠可获得（1.81±0.65）×10~8个肝细胞;活率为（87.46±6.90）%;细胞接种4 h即可贴壁,可存活2～3周。结论该法操作简便、经济,细胞产量和存活率高,贴壁和生长良好,可满足各种实验需求。