移植骨髓间充质干细胞对兔退变椎间盘髓核细胞凋亡的影响

摘要

目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对兔退变椎间盘髓核细胞凋亡的影响。方法以各兔L2/3、L3/4、L4/5、L5/6节段分为正常组、退变组、成纤维细胞（SFs）移植对照组、MSCs移植治疗组。MSCs和SFs分别经绿色荧光蛋白（GFP）转染后,注射植入退变椎间盘的髓核。通过透射电镜观察退变椎间盘凋亡髓核细胞形态;用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测退变组织中髓核细胞凋亡相关基因bcl-2和bax mRNA的表达;免疫荧光法标记髓核细胞凋亡相关蛋白Caspase-3,并通过TUNEL法标记凋亡髓核细胞,激光共聚焦显微镜检测髓核细胞凋亡蛋白表达率和细胞凋亡比率。结果透射电镜下,退变椎间盘中凋亡髓核细胞呈现出核染色质边集,空泡形成,核膜断裂,凋亡小体形成等变化。MSCs移植治疗组bcl-2 mRNA的表达量高于退变组和SFs移植对照组（P＜0.05）,bax mRNA的表达量与退变组差异无统计学意义（P＞0.05）。MSCs移植治疗组细胞凋亡率和Caspase-3表达率均高于正常组[细胞凋亡率分别为（16.75±2.14）%和（6.86±1.08）%;Caspase-3表达率分别为[（20.34±1.03）%和（6.09±0.77）%]（P＜0.05）,低于退变组和SFs移植对照组[细胞凋亡率分别为（31.87±4.16）%和（29.02±2.16）%;Caspase-3表达率分别为（31.50±3.78）%和（30.20±4.93）%]（P＜0.05）。结论髓核细胞凋亡在椎间盘退变过程中起重要作用。MSCs移植能有效抑制椎间盘髓核细胞凋亡,延缓椎间盘退变过程。