5-氮-2-脱氧胞苷调控p53-bax凋亡通路DNA甲基化对胆管癌细胞生长的影响

摘要

目的探讨甲基转移酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷（DAC或5-aza-dc）对胆管癌细胞QBC939生长的影响及其机制。方法应用噻唑蓝（MTT）比色法检测DAC在不同浓度（0.1、0.5、1.0、5.0、25.0、100.0μmol/L）及不同时间（24、48、72 h）下对胆管癌细胞QBC939存活率的影响,透射电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪观察细胞生长周期及凋亡率的变化;甲基化聚合酶链反应检测DAC作用前后p53-bax凋亡通路DNA甲基化变化。结果 DAC对QBC939细胞生长的抑制有浓度和时间依赖性,其半数抑制率(IC50)为72 h 5μmol/L;经DAC作用后电镜下胆管癌细胞凋亡增加;胆管癌细胞凋亡发生率由DAC处理前的4.31%上升至处理后的43.04%;DAC作用前p53-bax凋亡通路中p14、DAPK抑癌基因甲基化,DAC作用后p14、DAPK抑癌基因脱甲基化。结论 DAC对胆管癌QBC939细胞的生长具有抑制作用,这一抑制作用是由于DAC脱甲基化造成的,DAC对胆管癌QBC939细胞p53-bax线粒体凋亡通路DNA甲基化的影响使细胞凋亡功能得以恢复。